品牌 AAT Bioquest 貨號(hào) 15273/15274 規(guī)格 250 Tests 供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 Amplite®比色NAD/NADH（NADP/NADPH）比值測(cè)定試劑盒 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
AAT Bioquest 15273/15274 Amplite® 比色NAD/NADH （NADP/NADPH ）比值測(cè)定試劑盒
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AAT Bioquest 比值測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨
美國(guó)AAT Bioquest Inc.( 前身是ABD Bioquest ，Inc.) 是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開(kāi)發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest 的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值檢測(cè)試劑盒 250 Tests
AAT Bioquest 15274 Amplite® 比色法 NADP/NADPH 比值檢測(cè)試劑盒 250 Tests
AAT Bioquest 比值測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值檢測(cè)試劑盒 250 Tests
煙xian 胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+ ）和煙xian 胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+ ）是細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的兩種重要的輔助因子。NADH 是NAD + 的還原形式，NAD + 是NADH 的氧化形式。它通過(guò)酯鍵將磷酸基團(tuán)添加到腺苷核苷酸的 2' 位置以形成 NADP 。NADP 用于合成代謝生物反應(yīng)，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH 作為還原劑。傳統(tǒng)的NAD / NADH 和NADP / NADPH 測(cè)定是通過(guò)監(jiān)測(cè)340nm 處的NADH 或NADPH 吸收來(lái)完成的。該方法靈敏度低，干擾高，因?yàn)闇y(cè)定是在需要昂貴的石英微孔板的紫外范圍內(nèi)進(jìn)行的。我們的 Amplite® NAD/NADH 比率檢測(cè)試劑盒為靈敏檢測(cè) NAD 、NADH 及其比率提供了一種方便的方法。NADH 探針是一種顯色傳感器，在NADH 還原時(shí)在~460nm 處具有最大吸光度。~460nm 處的吸光度增加與溶液中NADH 的濃度成正比。NADH 探針可以在無(wú)酶反應(yīng)中識(shí)別NADH ，并且吸光度酶標(biāo)儀可以在~460nm 處輕松讀取信號(hào)。Amplite® 比色 NADH 檢測(cè)試劑盒提供靈敏的檢測(cè)方法，可在 3 μL 檢測(cè)體積中檢測(cè)低至 100 μM NADH 。該測(cè)定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式進(jìn)行。
平臺(tái)
吸光度酶標(biāo)儀
吸光度 460 納米
推薦板 清除底部
組件
組分A ：NAD/NADH 回收酶混合物 2
組件 B-I ：NADH 探頭 1 4 mL ）
組件 B-II ：NADH 探針緩沖液 1 16 mL ）
組件C ：NADH 標(biāo)準(zhǔn)（FW ：709 ） 1 142 μg ）
組分D ：NAD 提取溶液 1 10 mL ）
組分E ：中和溶液 1 10 mL ）
組件F ：提取控制解決方案 1 瓶 （10 mL ）
組分G ：裂解緩沖液 1 10 mL ）
一目了然
協(xié)議摘要
1. 準(zhǔn)備 25 μL NADH 標(biāo)準(zhǔn)品和/ 或測(cè)試樣品
2. 加入 25 μL NAD 提取溶液
3. 37 歲孵化oC 15 分鐘
4. 加入 25 μL 中和溶液
5. 加入 75 μL NAD/NADH 工作溶液
6. 在室溫下孵育 15 分鐘至 2 小時(shí)
7. 監(jiān)測(cè) 460 nm 處的吸光度
重要說(shuō)明
強(qiáng)烈建議在37 °C 下用裂解緩沖液（組分G ）孵育細(xì)胞，并使用上清液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍每種試劑盒組分之一。
儲(chǔ)備溶液的制備
除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20 °C 。避免反復(fù)凍融循環(huán)
NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （1 mM ）
將 200 μL 1X PBS 緩沖液加入 NADH 標(biāo)準(zhǔn)品（組分 C ）小瓶中，制成 1 mM （1 nmol/ μL ） NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
NADH 標(biāo)準(zhǔn)
將 50 μL 1 mM （1 nmol/ μL ） NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液加入 450 μL 1X PBS 緩沖液 （pH 7.4 ） 中，生成 100 μM （100 pmols/ μL ） NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后取100 μM NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液，在1X PBS 緩沖液中進(jìn)行2 ：1 連續(xù)稀釋，以獲得連續(xù)稀釋的NADH 標(biāo)準(zhǔn)品（NS1 - NS7 ）。注意：稀釋的NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4 小時(shí)內(nèi)使用。
工作溶液的制備
將 8 mL NADH 探針緩沖液（組分 B-II ）加入 NAD/NADH 回收酶混合物（組分 A ）瓶中，并充分混合。
將 2 mL NADH 探針（組分 B-I ）加入組件 A+B-II 的瓶中，充分混合制成 NAD/NADH 工作溶液。
注意 這種NAD / NADH 工作溶液足以進(jìn)行125-200 次測(cè)定。工作溶液不穩(wěn)定，及時(shí)使用，避免直接暴露在光線下。
注意 可以嘗試使用ddH 2 O （例如500 uL ）溶解組分A ，然后按比例與B-II 和B-I 混合，以使NAD / NADH 工作溶液僅供充分使用。
AAT Bioquest 15274 Amplite® 比色法 NADP/NADPH 比值檢測(cè)試劑盒 250 Tests
煙xian 胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+ ）和煙xian 胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+ ）是細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的兩種重要的輔助因子。NADH 是NAD + 的還原形式，NAD + 是NADH 的氧化形式。它通過(guò)酯鍵將磷酸基團(tuán)添加到腺苷核苷酸的 2' 位置以形成 NADP 。NADP 用于合成代謝生物反應(yīng)，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH 作為還原劑。傳統(tǒng)的NAD / NADH 和NADP / NADPH 測(cè)定是通過(guò)監(jiān)測(cè)340nm 處的NADH 或NADPH 吸收來(lái)完成的。該方法靈敏度低，干擾高，因?yàn)闇y(cè)定是在需要昂貴的石英微孔板的紫外范圍內(nèi)進(jìn)行的。我們的 Amplite® NADP/NADPH 比率檢測(cè)試劑盒為靈敏檢測(cè) NADP 、NADPH 及其比率提供了一種方便的方法。NADPH 探針是一種顯色傳感器，在NADH 還原時(shí)在~460nm 處具有最大吸光度。~460nm 處的吸光度增加與溶液中NADPH 的濃度成正比。NADPH 探針可以在無(wú)酶反應(yīng)中識(shí)別NADPH ，并且吸光度酶標(biāo)儀可以在~460nm 處輕松讀取信號(hào)。Amplite® 比色法 NADPH 檢測(cè)試劑盒提供靈敏的檢測(cè)方法，可在 3 μL 檢測(cè)體積中檢測(cè)低至 100 μM NADPH 。該測(cè)定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式進(jìn)行。
平臺(tái)
吸光度酶標(biāo)儀
吸光度 460 納米
推薦板 清除底部
組件
組分A ：NADP / NADPH 回收酶混合物 2
組件 B-I ：NADPH 探頭 1 4 mL ）
組分 B-II ：NADPH 探針緩沖液 1 16 mL ）
組件C ：NADPH 標(biāo)準(zhǔn) 1 瓶 （167 μg ）
組分D ：NADP 提取液 1 瓶 （10 mL ）
組分E ：中和溶液 1 10 mL ）
組件F ：提取控制解決方案 1 瓶 （10 mL ）
組分G ：裂解緩沖液 1 10 mL ）
1. 準(zhǔn)備 25 μL NADPH 標(biāo)準(zhǔn)品和/ 或測(cè)試樣品
2. 加入 25 μL NADP 提取溶液
3. 在37 °C 孵育15 分鐘
4. 加入 25 μL 中和溶液
5. 加入 75 μL NADP/NADPH 工作溶液
6. 在室溫下孵育 15 分鐘至 2 小時(shí)
7. 監(jiān)測(cè) 460 nm 處的吸光度
重要說(shuō)明
強(qiáng)烈建議在37 °C 下用裂解緩沖液（組分G ）孵育細(xì)胞，并使用上清液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍每種試劑盒組分之一。
儲(chǔ)備溶液的制備
除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20 °C 。避免反復(fù)凍融循環(huán)
NADPH 標(biāo)準(zhǔn)溶液 （1 mM ）
將 200 μL PBS 緩沖液加入 NADPH 標(biāo)準(zhǔn)品（組分 C ）的小瓶中，以獲得 1 mM （1 nmol/ μL ） NADPH 儲(chǔ)備溶液。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
NADPH 標(biāo)準(zhǔn)
將 10 μL 1 mM NADPH 儲(chǔ)備溶液加入 490 μL PBS 緩沖液 （pH 7.4 ） 中，生成 20 μM （20 pmols/ μL ） NADPH 標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后取20 μM NADPH 標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行1 ：2 系列稀釋，以獲得剩余的連續(xù)稀釋NADPH 標(biāo)準(zhǔn)品（NS7 - NS1 ）。注意：稀釋的NADPH 標(biāo)準(zhǔn)溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4 小時(shí)內(nèi)使用。
工作溶液的制備
1. 將 8 mL NADPH 探針緩沖液（組分 B-II ）加入 NADP/NADPH 回收酶混合物（組分 A ）瓶中，并充分混合。
2. 將 2 mL NADPH 探針（組分 B-I ）加入同一瓶中（來(lái)自步驟 1 ）并充分混合。
注意此NADP / NADPH 工作溶液足以進(jìn)行125-200 次測(cè)定。工作溶液不穩(wěn)定，及時(shí)使用，避免直接暴露在光線下。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值檢測(cè)試劑盒 250 Tests
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