AAT Bioquest  22804  Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*

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AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22804

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest 線粒體膜電位檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

該特定試劑盒旨在通過測量線粒體膜電位（MMP）的損失來檢測細胞凋亡。線粒體膜電位的崩潰與線粒體通透性過渡孔的打開相吻合，導(dǎo)致 xi胞se素C釋放到細胞質(zhì)中，進而觸發(fā)凋亡級聯(lián)中的其他下游事件。我們的細胞計™橙色線粒體膜電位檢測試劑盒通過優(yōu)化的檢測方法提供所有必需的成分。該熒光測定使用我們專有的陽離子MitoLite™橙來檢測線粒體膜電位喪失的細胞凋亡。在正常細胞中，當(dāng)線粒體中積累MitoLite™橙色時，紅色熒光強度增加。然而，在凋亡細胞中，MitoLite™橙的熒光強度在MMP崩潰后降低。用MitoLite™橙色染色的細胞可以用流式細胞儀在488nm激發(fā)下以紅色發(fā)射（FL2通道）觀察。該試劑盒可與其他試劑一起使用，例如細胞計™磷脂酰絲an酸凋亡檢測試劑盒（22835），用于細胞活力和細胞凋亡的多參數(shù)研究。該試劑盒針對使用流式細胞儀篩選細胞凋亡激活劑和抑制劑進行了優(yōu)化。

組件

組件 A：DMSO 中的 500X MitoTell Orange ™  1 瓶 （200 μL）

組分B：檢測緩沖液    1 瓶 （100 mL）

1.    用密度為 5 × 10 的測試化合物制備細胞⁵至 1 × 10⁶細胞/毫升

2.    將 2 μL 的 500X MitoTell™ 橙子加入 1 mL 細胞溶液中

3.    將細胞在37°C，5%CO中孵育2培養(yǎng)箱 15 - 30 分鐘

4.    沉淀細胞，并將細胞重懸于1 mL生長培養(yǎng)基中

5.    使用具有FL2通道的流式細胞儀分析細胞

重要說明：在開始實驗之前，在室溫下解凍所有試劑盒成分。

實驗方案樣本

1.    對于每個樣品，在您選擇的 1 mL 溫?zé)崤囵B(yǎng)基或緩沖液中制備細胞，密度為 5×105至 1×106細胞/毫升。注意：應(yīng)單獨評估每個細胞系，以確定誘導(dǎo)細胞凋亡的最佳細胞密度。

2.    用測試化合物處理細胞一段時間以誘導(dǎo)細胞凋亡，并建立平行對照實驗。

對于陰性對照：僅用載體處理細胞。

對于陽性對照：用FCCP或CCCP在5 oC，50%CO中以37-5μM處理細胞2培養(yǎng)箱15至30分鐘。注意：CCCP或FCCP可以與MitoTell™ Orange同時添加。為了獲得最佳結(jié)果，可能需要對每個單獨的細胞系滴定CCCP或FCCP。

3.    向處理過的細胞中加入 2 μL 500X MitoTell™ 橙（組分 A）。

4.    將細胞在37°C，5%CO中孵育2培養(yǎng)箱15至30分鐘。注意：對于貼壁細胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整，并在用MitoTell™橙染料負載溶液孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。

5.    以 1000 rpm 離心細胞 4 分鐘，然后將細胞重新懸浮在 1 mL 檢測緩沖液（組分 B）或您選擇的緩沖液中。

6.    使用具有FL2通道的流式細胞儀（Ex / Em = 540 / 590 nm）監(jiān)測熒光強度。對感興趣的細胞進行門控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購信息：

22804 Cell Meter™線粒體膜電位檢測試劑盒 *針對流式細胞術(shù)優(yōu)化的橙色熒光*  100 Tests